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DTNB
中文名：Ellman试剂
CAS：69-78-3
品牌：MedChemExpress (MCE)
存储条件：Powder: -20°C, 3 years; 4°C, 2 years.In solvent: -80°C, 6 months; -20°C, 1 month.
生物活性：DTNB（埃尔曼试剂）是一种用于量化硫醇基团数量或浓度的化学品[1]。
体外：DTNB 与半胱氨酸的游离巯基侧链反应，在蛋白质和硫代硝基苯甲酸 (TNB) 残基之间形成 SS 键[1]。
DTNB 相对于替代试剂（例如 N-乙基马来酰亚胺或碘乙酰胺）的主要优势在于该试剂的选择性以及能够通过分光光度法跟踪反应过程[1] .
用 DTNB 修饰酶：
通过在室温下将 10 μL 的 10 mM DTNB 溶液（大约 20 倍摩尔过量）与 0.6 mL 反应，对酶的 SH 基团进行修饰80 mM 磷酸盐缓冲液 (0.807 mg/mL) 中的酶溶液 (0.807 mg/mL)，pH 8.0，含有 1 mM EDTA，之前已针对相同缓冲溶液透析 24 小时。使用 13,600 M-1cm-1 释放的硫代硝基苯甲酸离子的摩尔消光系数，根据 410 nm 处吸光度的增加估算 SH 基团的数量。
参考文献：
[1]. T Nagaoka, et al. DTNB modification of SH groups of isocitrate dehydrogenase from Bacillus stearothermophilus purified by affinity chromatography. J Biochem. 1977 Jan;81(1):71-8.
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