科研无小事（一）细胞的STR鉴定

做实验的时候才发现细胞的种类太多，于是我们需要查询各种文献看每个细胞的特征，从而设计实验规划与步鄹，我们在紧凑的实验种完美了实验，提交文章的时候，才发现，需要细胞鉴定。

据统计约30%细胞系被交叉污染或错误辨识,因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗灾难性后果……这浪费大量时间、精力和金钱。因此NIH、ATCC等权威机构多次发出呼吁，要求研究者对细胞进行鉴定，最近美媒报道1/6科学家在研究使用“假冒”细胞，2014年12月、2015年2月Science杂志分别发表文章专题阐述细胞交叉污染和错误辨识的严重性；2015年4月Nature通知：Nature旗下所有杂志将要求作者鉴定论文中所用细胞系；2015年6月即有报道称一科学家因用错细胞系，撤销Nature论文。NIH、ATCC、Nature和Science等机构对此多次发出呼吁,要求研究者对细胞进行鉴定，STR基因分型已被作为金标准应用于细胞系鉴定,越来越多杂志开始要求投稿人提供细胞STR鉴定结果。

在2011年美国就已经颁布了细胞STR鉴定国家标准（ANSI/ATCC ASN-0002-2011）。目前STR检测已被广泛应用于亲子鉴定、个体识别、细胞来源判定等方面。ATCC、DSMZ、JCRB等国际知名细胞库已将STR基因分型列为细胞鉴定的金标准。

STR鉴定已经成为了细胞株的“身份证”能在科研界通行无阻，必须要有STR。那么动物源呢，因为建立的DNA条带并不完善，目前只有小鼠的部分细胞可以提供STR。

STR鉴定描述：

利用荧光标记扩增产物长度多态分析方法对细胞样本进行9个/16个STR位点进行分型。设计PCR引物，组成2个PANEL用于扩增多态位点。位点的荧光标记采用引物上标记5’FAM荧光标记。引物用在线Primer3 软件设计（http://frodo.wi.mit.edu/cgi-bin/primer3/primer3_www.cgi）。PCR产物稀释后取少量与内标标记混匀后直接上ABI 3130xl进行毛细管电泳，数据文件用GeneMapper4.0（Appliedbiosystems）来分析。

STR（Short Tandem Repeat，短串联重复序列）是一类广泛存在于真核生物基因组中的DNA串联重复序列，由于其核心序列重复次数存在个体差异多态性，因此STR也被称为细胞的DNA指纹。

我们的收样和鉴定：

1. T25瓶活细胞和冻存管或将1×10的五次方以上细胞悬液置于1.5毫升EP管，用封口膜密封，做好标记并附送清单。

2. 鉴定时间：2周内出结果，提供鉴定报告。